¿Cuál es la técnica para hacer ADN recombinante?

September 3

Fondo

ADN (ácido desoxirribonucleico) es el modelo que guía el desarrollo de los seres vivos. ADN recombinante es una técnica que se utiliza para insertar material genético tomado de un organismo a otro organismo (a menudo las bacterias). Esto se realiza in vitro, es decir, fuera de un organismo. ADN recombinante se produce por varias razones, incluyendo para producir productos de proteína tales como la insulina o HGH (hormona de crecimiento humana) con fines médicos, para crear un nuevo rasgo en un organismo, tales como la inserción de genes en los cultivos para que sean resistentes a las plagas, y para crear copias de un gen para ser utilizados en entornos de investigación.

Técnica

La técnica para la fabricación de ADN recombinante en, por ejemplo, una bacteria es relativamente simple. El primer paso en el proceso es para los científicos a la identidad del gen específico que se corresponde con el rasgo específico que desea replicar. Una vez identificado el gen, debe ser embebido en la bacteria. Esto se logra mediante la alteración de plásmidos, que es una secuencia de ADN que no es un componente de maquillaje cromosómico de la bacteria, pero se replicará con la bacteria. El plásmido se corta con una enzima especial llamado una enzima de restricción. El gen para la característica deseada se modifica de manera que se ajuste en los extremos del corte del ADN del plásmido. Cuando el nuevo gen y el plásmido se empotra, se emplea una enzima llamada ADN ligasa para crear una unión permanente entre el ADN plásmido y ADN nuevo. El plásmido alterado se toma entonces en la bacteria y se replica con la bacteria. En la práctica, por lo que el ADN recombinante a través de este método es demasiado lento y engorroso para producir resultados viables a un nivel significativo.

Ampliación de la producción a escala

La técnica para la fabricación de ADN recombinante a gran escala es, en cierto modo, un proceso más descuidado. Se trata de la combinación de millones de los plásmidos y los nuevos genes con enzimas de restricción. A continuación, las bacterias son inducidos químicamente para ocupar los plásmidos alterados. Por desgracia, todo esto ocurre al mismo tiempo y sólo algunas bacterias tomando así los plásmidos correctos. Para superar este obstáculo, el proceso está manipulado para hacer establecer qué bacterias tienen los plásmidos apropiados fácil de determinar. Una manera es alterar los plásmidos de tal manera que si las bacterias son capaces de crecer en ampicilina y no se vuelven azules, hay una buena probabilidad de que están llevando los plásmidos apropiados. Esto se puede comprobar con un proceso llamado hyperbridization de ácidos nucleicos, lo que implica dividir el ADN de las bacterias y plásmidos y su combinación con una etiqueta que puede ser radiactivo o fluorescente. Estas etiquetas están diseñadas para combinar sólo con el ADN del gen deseado. Después se determinan las bacterias adecuadas, que se cultivan a gran escala.


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