Cómo calcular la molaridad de Proteínas

October 2

Cómo calcular la molaridad de Proteínas


Cuando la purificación de proteínas, tiene que ser capaz de calcular su concentración. Hay una variedad de maneras de hacerlo, incluyendo la prueba de Biuret, el ensayo de Lowry, el ensayo BCA y el ensayo de Bradford, todos los cuales tienen ventajas y desventajas. Al final, sin embargo, todos ellos proporcionan esencialmente la misma información: absorbancia de una muestra diluida frente a la absorbancia a la misma longitud de onda para soluciones de concentración estándar. Cuando usted tiene estos datos, se puede utilizar para calcular su concentración de proteína.

Instrucciones

1 Ingrese a su programa de hoja de cálculo y escriba los datos de las normas en una nueva hoja de cálculo. Ponga "molaridad" de las proteínas en la solución estándar en una columna y "absorción" en la longitud de onda que utilizó en otro.

2 Graficar los datos de normalización y la etiqueta de su gráfico. Hacer molaridad de que está en el eje x y la absorbancia está en la y.

3 El uso de las herramientas de regresión o la línea de tendencia lineal en su programa de hoja de cálculo, encontrar una línea de mejor ajuste a los datos. Si es necesario, consulte el manual del usuario de su programa de hoja de cálculo para obtener instrucciones.

4 Tome la absorbancia para sus soluciones de proteínas de concentración desconocida y conectarlos a la ecuación derivada por su programa de hoja de cálculo. Usted puede utilizar su programa de hoja de cálculo para hacer los cálculos para usted si va a ser útil.

Ejemplo: Si su programa de hoja de cálculo deriva la ecuación y = 0,5 x 0,4 +, donde y es la absorbancia yx es molaridad, se puede resolver esta ecuación para x reordenando la siguiente manera:

(Y - 0,4) / 0,5 = x

a continuación, conecte su medida de absorbancia para y de la siguiente manera:

(0,5 a 0,4) / 0,5 = x

0,1 / 0,5 = 0,2 moles por litro

Consejos y advertencias

  • Tenga en cuenta que la concentración de proteína se calcula normalmente en términos de microgramos por microlitro en lugar de moles por litro, aunque se puede utilizar en lugar molaridad si lo prefiere.

Artículos relacionados