¿Cómo se identifica el ADN recombinante?

March 4

¿Cómo se identifica el ADN recombinante?


Toda la información necesaria para crear un organismo reside en su ADN. Una base que consiste en azúcar, fosfato y una base nitrogenada hace el ADN. Hay cuatro bases de nitrógeno, adenina (A), timina (T), guanina (G) y citosina (C). Cada base de nitrógeno siempre se empareja con su contraparte. La adenina se asociará a la timina y la citosina con guanina se asociará. Todos los organismos tienen las mismas cuatro bases nitrogenadas. Lo que separa a un organismo de otro es el número de pares de bases, y la secuencia de sus arreglos. Protein da un organismo de su estructura. Un proceso químico complejo convierte ADN en ARN mensajero (ARNm) y mRNA finalmente se convierte en la proteína traducida, que da el organismo de su estructura final.

Definición ADNr

DNA recombinante (rDNA) es el nombre general para la toma de una pieza de un ADN, y la combina con otra cadena de ADN. Es mejor si se piensa en ADNr como ADN quimera. (Una quimera era un monstruo griego antiguo que consiste en el cuerpo de un león con cabeza de cabra que sale de la columna vertebral con una serpiente por la cola.) Cuando los científicos se combinan dos o más hebras diferentes de ADN, que son capaces de crear una nueva cadena de DNA. La combinación del ADN de dos organismos diferentes es el proceso más común recombinante.

Producción ADNr

Antes de poder entender cómo identificar ADNr, debe tener una comprensión de cómo los científicos a crear ADNr en el primer lugar. Los tres métodos de producción de ADNr son la transformación, la transformación no bacteriana y la introducción del fago.

Transformación

En la transformación, se inserta una pieza seleccionada de ADN en un vector, y luego se corta ese pedazo de ADN con una enzima de restricción. A continuación, se utiliza ADN ligasa para colocar el inserto de ADN en el vector. El vector se introduce en una célula huésped (por lo general E. coli), que ha sido especialmente preparada para tomar el ADN extraño.

La transformación no bacteriana

Esto es similar a la transformación, con la excepción de que las células huésped son no bacteriana. O bien se inserta el vector a través de microinyección donde se inserta el ADN directamente en el núcleo, o mediante biolística donde la alta velocidad micro proyectiles bombardean las células huésped hasta que se absorba el ADN del vector.

Los fagos Introducción

introducción Phage es el proceso de transfección, que es equivalente a la transformación. En lugar de utilizar una bacteria, se utilizaría un fago tales como lambda o M13.

identificación de ADNr

Cuando se está preparando su vector, formateará con un marcador seleccionable. Este marcador le permitirá distinguir y otros huéspedes transformados con ADN recombinante a partir de huéspedes no transformadas. El marcador seleccionable más a menudo utilizado es un marcador antibiótico. Mediante el uso de un marcador antibiótico, se puede identificar rápidamente que las células contienen ADN recombinante ya que la exposición a ciertos antibióticos va a matar una célula huésped, sin ADNr, ya que no es resistente al antibiótico. Cualquier célula que son resistentes a los antibióticos son aquellos que contienen el vector y, por lo tanto, el rDNA.


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