Técnicas de Microbiología de tinción

April 6

Técnicas de Microbiología de tinción


Las células no teñidas son normalmente transparente o translúcido, lo que los hace difíciles de ver y estudiar. Por lo tanto, los microbiólogos tiñen las bacterias para mejorar su contraste y la visibilidad bajo el microscopio. La tinción también puede ayudar a los científicos a distinguir entre diferentes tipos de bacterias. Por ejemplo, la determinación de si una bacteria es Gram-positivas o Gram-negativas es un paso importante en la identificación de un aislado bacteriano desconocido.

Tipos de tintes

Los tintes utilizados como manchas biológicas son típicamente sales orgánicas que comprenden un ion de color y un ion incoloro. En un colorante básico, el ion orgánico de color está cargado positivamente, por lo que es atraído hacia las sustancias con carga negativa. El citoplasma de las células bacterianas tiende a absorber los colorantes básicos. colorantes ácidos, por el contrario, contienen un ion orgánico cargado negativamente que la superficie de la bacteria repele; estos colorantes tienden a manchar todo el organismo, la creación de un fondo de color contra la cual la bacteria es transparente. Otros colorantes, como la tinta china, son de pH neutro.

tinción de Gram

La tinción de Gram bacterias divide en dos grandes clases: los que dan positivo en la tinción de Gram, y los que no lo hacen. Esta distinción refleja una diferencia estructural. Las bacterias gram-positivas tienen una pared celular gruesa que es rica en peptidoglicanos, mientras que las bacterias Gram-negativas tienen una fina capa de peptidoglicanos intercaladas entre una membrana interior y exterior. El primer paso en la tinción de Gram es aplicar violeta de cristal, seguido de Gram yodo; las bacterias absorben el colorante cristal violeta, que agrega con los iones de yoduro. A continuación, un breve tratamiento con acetona elimina el violeta cristal de las células Gram-negativas; que no afecta a la mancha en las células Gram-positivo, porque su pared celular de peptidoglicano es mucho más gruesa. Por último, una aplicación de contratinción safranina convierte bacterias Gram-negativas de color rosa. Las bacterias Gram-positivas, por el contrario, conservan el violeta cristal, y por lo tanto aparecen púrpura bajo el microscopio.

Ziehl-Neelsen

Debido a la composición de sus paredes celulares, algunas bacterias teñidas son "ácido-rápido", lo que significa que no van a perder su color si se expone a un ácido diluido. Mycobacterium tuberculosis, la bacteria que causa la tuberculosis, es un ejemplo prominente. La tinción con colorante de un espécimen carbol fucsina mientras se calienta, decolorante la muestra con un ácido, y a continuación, la contratinción con otro tinte revelará si las bacterias ácido-resistentes están presentes. Este procedimiento se llama la tinción de Ziehl-Neelsen.

La mancha azul de metileno

En este proceso, las bacterias se colocan en un portaobjetos, y se tiñeron con un colorante básico matado por calor llama azul de metileno. Esta mancha hace que sea más fácil de inspeccionar la morfología o forma, de las bacterias. Algunas bacterias son en forma de barra, mientras que otros son esféricas o incluso de caracol; La tinción con azul de metileno ayuda a los microbiólogos reconocen estas diferencias estructurales.

tinta de la India

Esta técnica consiste en la suspensión de microbios en solución salina y, a continuación la tinción con tinta china. Bajo el microscopio, la tinta china es muy oscuro; si un microbio tiene una cápsula gelatinosa, que se destacan claramente en este contexto. Esto se conoce como una tinción negativa, porque en lugar de la coloración del microbio, colorea alrededores del microbio de la diapositiva. Esta técnica es particularmente útil cuando se trabaja con ciertos hongos, especialmente Cryptococcus neoformans.


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